多克隆抗體制備流程
發(fā)布時間：2020-08-17 00:11:48來源：抗體知識專題
一般的科研實驗中，我們經(jīng)常使用的抗原有天然蛋白、重組蛋白、偶聯(lián)的多肽、偶聯(lián)的小分子化合物等。
2.抗原乳化將抗原與弗氏佐劑按1:1混合后進行乳化，其中一免采用弗氏完全佐劑，以后均采用弗氏不完全佐劑。乳化時間在半個小時左右，當其乳化半小時后，取出攪拌器頭，在一裝有水的容器口輕輕敲一下，讓攪拌鐵絲上粘有的乳化后的免疫原掉一滴到水里，其遇水不擴散時即已乳化好。如還有擴散現(xiàn)象，繼續(xù)乳化。
3.免疫動物免疫所用的動物盡量選擇適齡的雄性動物（多克隆抗體制備動物通常選雄性兔）。將乳化好的抗原轉(zhuǎn)入2.5mL的注射器中，排除注射器中的氣泡，在兔背部進行多點皮下注射。每次注射量在300-500ug。
4.抗血清鑒定四免后三到五天少量取血進行效價檢測，確認免疫是否成功。
5.抗血清制備經(jīng)抗血清鑒定免疫成功以后，殺死實驗動物，收集全部血清。
6.抗血清純化選擇合適的方法純化抗血清，得到抗體。
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