評價體外診斷試劑的正確度是體外診斷產(chǎn)品研發(fā)與評價中的一個重要環(huán)節(jié)，旨在確保測量結(jié)果的可靠性和臨床診斷價值。正確度是指測量值與真實值之間的一致性程度，主要評估系統(tǒng)測量誤差或偏差。

體外診斷試劑正確度的試驗設(shè)計主要包括以下幾個方面：

1. 與有證參考物質(zhì)（Certified Reference Material, CRM）或參考方法進行比對

   目的：通過將體外診斷試劑的測量結(jié)果與已知真實值的參考物質(zhì)或參考方法進行比較，來驗證產(chǎn)品的正確度。

   試驗設(shè)計

   • 直接比對：使用體外診斷產(chǎn)品檢測有證參考物質(zhì)，并將測量結(jié)果與該參考物質(zhì)的認證值進行比較，計算偏差和百分比偏差。

   • 間接比對：將參考物質(zhì)與典型臨床樣品一同進行檢測，比較結(jié)果并計算偏差和百分比偏差。

   • 要點：測量程序應符合國際標準和參考程序。

2. 回收實驗（Recovery Experiment）

   目的：評估體外診斷試劑在不同濃度下對被分析物的測量能力是否準確，通過測定回收率來評價正確度。

   試驗設(shè)計

   • 樣品制備：向若干份（例如3-4份）不同濃度（低、中、高）的樣品中加入已知量的純被分析物。

   • 測量：使用待評價的體外診斷試劑測量加入被分析物的樣品濃度。

   • 計算：計算回收率（R），通常要求每個濃度水平至少進行3次重復測量。

3. 方法學比對實驗（Method Comparison Experiment）

   目的：將新開發(fā)的體外診斷試劑（待測方法）的性能與已驗證的參考方法或市場上的現(xiàn)有方法（比較方法）進行比較，以確定兩者之間的一致性，從而評價待測方法的正確度。這是評價正確度的常用方法。

   試驗設(shè)計（通常參照CLSI EP09-A3和EP05-A3等文件進行）

   • 樣品選擇與數(shù)量

     應選擇未經(jīng)處理的臨床樣品，覆蓋產(chǎn)品測量范圍內(nèi)的各個濃度水平。

     樣品應具有代表性，能反映目標人群的特點。

     一般建議至少使用40份樣品進行比對。對于免疫學診斷試劑，建議至少使用100份樣品。

     如需評價異常離群值，可能需要增加樣品數(shù)量，例如在20%的樣品超出限值時，可能需額外增加樣品至100或120份。

     樣品應妥善保存，避免在測量前發(fā)生變化。

   • 測量操作

     測量應由經(jīng)過培訓的操作人員在校準過的儀器上進行。

     待測方法和比較方法的測量應在同一時間進行。

     通常對每個樣品進行重復測量，例如重復測量2次或更多次。

     重復測量的次數(shù)可根據(jù)精密度要求確定。

   • 數(shù)據(jù)分析

     離群值檢查：對數(shù)據(jù)進行離群值分析（例如Grubbs檢驗），以識別和處理異常數(shù)據(jù)。應調(diào)查離群值的原因，并在必要時考慮是否剔除。

     圖示分析

   • 偏差圖：繪制兩種方法測量結(jié)果的差異（絕對或百分比）與比較方法測量結(jié)果（或平均值）的散點圖，用于識別系統(tǒng)偏差和比例偏差。

   • 散點圖：以比較方法的測量結(jié)果為x軸，待測方法的測量結(jié)果為y軸繪制散點圖，直觀評估兩者的一致性。

     回歸分析：采用合適的回歸模型（如線性回歸、加權(quán)線性回歸、Deming回歸或Passing-Bablok回歸）來建立兩種方法之間的數(shù)學關(guān)系。根據(jù)回歸結(jié)果評估兩種方法是否存在系統(tǒng)偏差或比例偏差。

     偏差計算：計算在整個測量范圍內(nèi)的偏差（絕對偏差或百分比偏差），并確定其95%置信區(qū)間，評估其臨床可接受性。

4. 總體考量

• 整個正確度評價過程應科學合理、規(guī)范，并全程詳細記錄。

• 應充分參考和遵循相關(guān)的國家標準、行業(yè)標準以及國際指南文件（如CLSI EP09-A3）。

• 試驗設(shè)計應充分考慮可能影響測量結(jié)果的各種因素，確保結(jié)果的可靠性和可溯源性。